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李軻反轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）是一種體外核酸擴增技術，它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點，能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定，所以近年來RT-PCR技術被廣泛應用于人和動物的多種傳染病早期診斷。筆者一直從事實驗室動物疫病檢測工作，現就應用RT-PCR實驗方法過程中出現的一些常見污染問題做如下論述，僅共同行參考和探討。RT-PCR實驗有三步：提取RNA、反轉錄（RT）、PCR擴增及擴增產...

輔助方案：膠原酶消化制備脾臟細胞懸液實驗材料：1.4000U/ml膠原酶D，融化后置于冰上2.HBSS，已滅菌，含Ca+、Mg2+（購置于LifeTechnologies）3.小鼠脾臟4.皮下注射針，22G×11/2in內徑（BectonDickinson）5.10ml、5ml一次性注射器（如BectonDickinson）6.100mm直徑培養皿（如Falcon）7.2個高壓滅菌鍋的鋸齒狀解剖鑷（如Roboz）8.高壓滅菌的不銹鋼網：將40目的不銹鋼網剪成5cm×5cm的小...

腫瘤是細胞在各種致瘤因素的作用下，基因發生改變，失去對其生長的正常調控，導致細胞異常增生。惡性腫瘤又稱為癌癥（cancer），是目前危害人類健康zui嚴重的一類疾病。我國城市地區居民死因*位為惡性腫瘤。腫瘤細胞在很多生物學特性上不同于正常細胞，也有別于修復性增生的細胞，具有明顯的去分化現象。一、腫瘤細胞的分化特征惡性腫瘤細胞的特征之一是分化程度低，表現為形態上的幼稚性，功能上的異常，細胞的多種表型（phenotype）又回到原始的胚胎細胞表型，即發生細胞的去分化現象。機體在致...

生物、藥物等許多的研究均需要通過觀察細胞體積的變化或細胞數目增減的來判斷和評估實驗的效果。由于細胞所處環境的改變可促使其自身體積做出相應的變化，以便適應改變后的環境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細胞體積變化規律，因此必須檢測其體積或細胞數目隨條件、時間的變化。細胞的發育與細胞分裂周期級數遞增均需要連續不斷的細胞增殖。在培養液中正在增殖的細胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對細胞發育與分裂的速度作如何調整才能保證細胞體積的不變并不明確。因此，測量細胞的體積的變...

二、實驗原理細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合，是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸，細胞變園，細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬...

（一）原理混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。（二）材料及試劑1．尼龍毛（FemwallLaboratories,LP－1LeukoqakleukocyteFilters）。2．燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3．裝填尼龍毛柱，一次性注射器。4．取自然沉降的上層血漿，過聚蔗糖—泛影葡胺分層液后，獲取的血漿和分層液之間的單個核細胞層。（三）操作方法1．尼龍毛...